ICS 65.020 B 16 DB11 北 京 市 地 方 标 准 DB11/T 1431—2017 桃树根癌病综合防治技术规程 Technical regulations for control of peach crown gall (Agrobacterium tumefaciens) 2017 - 06 - 29 发布 北京市质量技术监督局 2017 - 10 - 01 实施 发 布 DB11/T 1431—2017 目 次 前言................................................................................. II 1 范围................................................................................ 1 2 规范性引用文件 ...................................................................... 1 3 术语和定义.......................................................................... 1 4 病情分级............................................................................ 1 5 防治措施............................................................................ 2 5.1 育苗期预防措施 .................................................................. 2 5.2 苗木选择与定植 .................................................................. 2 5.3 田间管理........................................................................ 2 5.4 药剂防治........................................................................ 2 6 育苗期预防效果调查 .................................................................. 2 附 录 A （资料性附录） 症状特征 ..................................................... 3 附 录 B （资料性附录） 发病规律 ..................................................... 4 附 录 C （资料性附录） 检测方法 ..................................................... 5 参考文献.............................................................................. 7 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 相关规则起草。 本标准由北京市园林绿化局提出并归口。 本标准由北京市园林绿化局组织实施。 本标准起草单位：北京市林业保护站、中国农业大学。 本标准参与起草单位：北京流村王园果园。 本标准主要起草人：王合、米莹、郭岩彬、王建辉、周在豹、杜金萍、龚硕、张崇岭、卢绪利、吴 有刚、王永明、王睿琦、赵连祥。 II DB11/T 1431—2017 桃树根癌病综合防治技术规程 1 范围 本标准规定了桃树根癌病病情分级、防治措施和育苗期防治效果调查。 本标准适用于北京地区桃树根癌病的防治，樱桃、樱花等植物根癌病的防治可参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 8321.9 农药合理使用准则（九） NY/T 2725 氯化苦土壤消毒技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 桃树根癌病 peach crown gall 又称桃树冠瘿病、桃树根瘤病，是一种细菌性病害，在根颈和根部产生肿瘤，导致树势衰弱，甚至 死亡。 3.2 桃树根癌病病原菌 pathogenic bacterium of peach crown gall 引起桃树根癌病的病原菌，为根癌土壤杆菌（Agrobacterium tumefaciens）。 3.3 抗根癌菌剂 root carcinoma bacteria resistance agent 对根癌病菌具有良好拮抗作用的微生物制剂。 4 病情分级 按肿瘤发生部位将病情分为 5 级，分级标准如下： 0 级：植株无肿瘤； 1 级：肿瘤发生在须根上； 2 级：肿瘤发生在侧根上； 3 级：肿瘤发生在侧根与主根的连接处； 4 级：肿瘤发生在主根、根颈或枝干上。 1 DB11/T 1431—2017 桃树根癌病症状特征参见附录A，发病规律参见附录B，检测方法参见附录C。 5 防治措施 5.1 育苗期预防措施 5.1.1 苗圃地选择 选择非发病地块作为育苗地，避免在前茬为豆类、蔬菜以及林地、林业苗圃等地块育苗；必要时可 对育苗地进行土壤熏蒸处理, 按 GB/T 8321.9 和 NY/T 2725 相关规定执行。 5.1.2 砧木种子处理 选择抗病的适宜砧木种子，播种前，用抗根癌菌剂拌种处理。 5.1.3 苗木嫁接 采用高位芽接法嫁接，避免接口与土壤接触；嫁接前，使用 75%酒精对嫁接工具进行消毒处理。 5.1.4 苗木出圃 对病情为 1 级、2 级的苗木剪除肿瘤，剪除的肿瘤及时销毁；对病情为 3 级、4 级的苗木及时销毁。 5.2 苗木选择与定植 5.2.1 对无症状苗木及剪除肿瘤的 1 级、2 级苗木进行蘸根处理并及时定植。 5.2.2 定植前，将抗根癌菌剂放入陶瓷、塑料等非金属容器中，加水，按 1:1 调匀成糊状，将剪根后的 桃苗浸入菌液中，浸入深度超过根颈上部 5cm，即可拿出栽植，随浸随栽。 5.3 田间管理 5.3.1 对于碱性土壤的果园，适当增施酸性肥料、有机肥和果树专用肥料。 5.3.2 减少果园土壤清耕等栽培管理措施以及蛴螬、蝼蛄等地下害虫对根系的伤害。 5.3.3 将大水漫灌、串灌改为一树一畦的单株灌溉或滴灌。 5.4 药剂防治 对已发病株及时切下肿瘤，用抗根癌菌剂等药剂涂抹伤口，切下的病瘤随即销毁。 6 育苗期预防效果调查 苗木出圃时，调查使用抗根癌菌剂和其它处理的苗木发病等级，计算防治效果。病情指数与防治效 果分别按式（1）、（2）计算： 病情指数= 防治效果= 2 å [各级病株数 × 相对级数值] ×100……………………(1) 调查总株数 × 4 对照的病情指数－处理的病情指数 ×100%……………………(2) 对照的病情指数 DB11/T 1431—2017 附 录 A （资料性附录） 症状特征 A.1 地下部分症状 桃树根癌病主要发生在根颈部和根部，包括侧根和须根，树干上偶见。根部被害后通常形成球形、 扁球形或不规则的肿瘤。初生瘤乳白色或略带红色，光滑，柔软，后逐渐变褐色乃至深褐色，木质化而 坚硬，表面粗糙或凹凸不平，龟裂，表面细胞枯死，内部木质化，并在瘤的周围或表面产生一些细根。 最后外皮脱落，露出许多突起状小木瘤，瘤的内部组织紊乱并混有薄壁组织及维管束，在较大的根瘤上 还会出现许多小瘤。肿瘤的数目少的 1～2 个，多的达 10 余个，直径差异很大，小如豆粒，大如胡桃和 拳头，甚至直径达数十厘米。 A.2 地上部分症状 苗木和新植幼龄桃树受害后，发育受阻，生长缓慢，植株矮小，严重时叶片黄化，早衰。成年果树 受害后，生长不良，果实小，甚至全株死亡。 3 DB11/T 1431—2017 A A 附 录 B （资料性附录） 发病规律 B.1 病原菌的越冬 病原菌在癌瘤组织的皮层内或在癌瘤破裂脱皮时进入土壤中越冬，细菌在土壤中能存活多年。 B.2 病原菌的侵入途径 病菌通过嫁接、昆虫或人为因素造成的伤口侵入植株。 B.3 病原菌的传播 雨水和灌溉水是自然传播的主要方式，苗木带菌是远距离传播的重要途径。 B.4 发病条件 B.4.1 温度湿度 病菌侵染与发病需要一定的湿度和温度，太低太高均不利于病害发生。当旬气温达到20℃～23.5℃， 地温18℃～20℃以及土壤和水质偏碱时，均有利于该病菌的侵染为害。 B.4.2 土壤理化性质 碱性土壤有利于发病,土壤pH值在6.2～8时均能保持病菌的致病力。偏碱性的土壤和湿度大的沙壤 土内发生重，酸性和粘重的土壤中很少发病。 B.4.3 嫁接方式 嫁接口的部位、接口大小及愈合的快慢均能影响发病程度。在苗圃中，嫁接口与土壤接触时间长， 染病机会多，发病率高。 4 DB11/T 1431—2017 附 录 C （资料性附录） 检测方法 C.1 致病性检测 C.1.1 致病菌分离 取新鲜的冠瘿瘤，用2%的次氯酸钠表面消毒2min，再用70%乙醇表面消毒90s，无菌生理盐水清洗3～ 5遍，用无菌剪刀将冠瘿瘤剪切成0.5cm的小块，加入2～5倍体积的无菌生理盐水，匀浆后，取上清，涂 板到土壤杆菌选择性培养基MW培养基上，28℃下培养48h～72h。 MW培养基：每升培养基中含有甘露醇，10.0 g；K2HPO4，0.3 g；生物素，100 μg；NaNO3，5.0 g； NaCl，0.2 g；MgSO4﹒7H2O，0.1 g；0.1%结晶紫，2.0ml；0.1% Fe-EDTA，2.0 ml；琼脂，15g～20g。 pH，7.0～7.2；121℃高压灭菌30 min。 C.1.2 致病性检测 8 取分离的单菌落，接种到LB培养基上培养48h。将待测菌液配制成浓度为10 CFU/ml的菌悬液 (OD600 为0.6)。用灭菌接种针在生长7d～10d的向日葵茎段上刺数下造成伤口，吸取5µl～10µl 待测菌液滴到 无菌棉球上后放置于伤口上，以封口膜包裹伤口，温室内培养15 d后观察结瘤情况，形成肿瘤的为发病。 C.2 冠瘿碱的检测方法 C.2.1检测用试剂 电泳检测缓冲液：按照甲酸:乙酸:水为5:15:80的比例