ICS 01.040.65 CCS B 00/09 34 安徽省 地方 标准 DB34/T 4597—2023 冬小麦品种抗倒春寒性评价规程 Regulations for evaluating the resistance of winter wheat varieties to late spring coldness 2023 - 10 - 07发布 2023 - 11 - 07实施 安徽省市场监督管理局 发布 DB34/T 4597 —2023 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由安徽农业大学提出。 本文件由安徽省 农业农村厅 归口。 本文件起草单位：安徽农业大学、 蒙城县种植业发展中心 、阜南广平种植专业合作社 、安徽永民种 业有限责任公司、 濉溪县农业技术 推广中心、淮北三丰肥业有限公司、淮北双收种业有限责任公司 。 本文件主要起草人： 陈翔、李金才、李志敏、李明、周楠、孙建强、吴金灵、李佳佳、刘莉、圣化军、孙晓 伟、汪善洋、贾训强 、赵伟。 DB34/T 4597 —2023 1 冬小麦品种抗倒春寒性评价规程 1 范围 本文件规定了冬小麦品种抗倒春寒性评价 的鉴定方法、倒春寒处理方法、主要指标选择和抗倒春寒 性鉴定评价分级等技术内容。 本文件适用于冬小麦品种抗倒春寒性的鉴定 评价。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 4404.1 粮食作物种子第 1部分：禾谷类 GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则 NY/T 496 肥料合理使用准则 通则 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 鉴定材料与方法 种子质量 4.1 供试小麦种质资源和品种的种子质 量应符合 GB 4404.1 的规定。 田间管理 4.2 4.2.1 供试材料应在 10 月中下旬播种。 选择直径 30 cm，高 35 cm 的圆柱形盆，装 耕层表土并施足 基肥，埋于试验田中，盆内土壤与盆外大田齐平。每个参试材料种植 10 盆，每盆定苗 9 株。 4.2.2 在进行小麦品种抗倒春寒性评价期间，要及时防 治病、虫、草和鸟害，防止倒伏等不利情况发 生。防治 病虫草害 农药使用应符合 GB/T 8321 （所有部分 ）和 NY/T 496 的要求。 倒春寒处理方法 4.3 4.3.1 人工模拟倒春寒处理 冬小麦生长至 幼穗分化的 药隔形成期（主茎倒二叶伸出、第三节间伸长）时，将 盆栽移入 人工气候 培养室，相对湿度 70%，光照夜 0 Lx，常温对照 10℃（CK），分别设置 -4℃、-2℃、0℃、2℃、4℃五 个低温处理 ，处理时间为凌晨 1:00-5:00。倒春寒处理过后移回大田原位置继续生长。 4.3.2 取样 DB34/T 4597 —2023 2 倒春寒处理后采集胁迫组 与对照组小麦主茎倒二叶用于指标测定与分析。 5 抗倒春寒性指标检测 可溶性糖含量 5.1 利用蒽酮比色法检测分析 （参见附录 A）。 保护酶活性 5.2 5.2.1 超氧化物歧化酶（ SOD）活性 利用氯化硝基四氮唑蓝光化还原法检测分析（参见附录 B）。 5.2.2 过氧化物酶（ POD）活性 利用邻甲氧基苯酚（愈创木酚）显色法检测分析（参见附录 C）。 5.2.3 过氧化氢酶（ CAT）活性 利用紫外吸收法检测分析（参见附录 D）。 丙二醛（ MDA）含量 5.3 利用硫代巴比妥酸法检测分析（参见附录 E）。 可孕小花数 5.4 小麦开花期，取主茎穗观察记录可孕小花数（具有雄蕊、子房、柱头和柱头羽毛的小花）。 产量性状 5.5 小麦收获期间，每种材料 （处理和对照 ）考察 10 个单株主茎的穗下节间长度（ cm）、小穗结实率、 穗粒数（粒）、 千粒重（ g）等产量组分及性状。 6 抗倒春寒性 鉴定评价分级 以可溶性糖含量、保护酶活性 、可孕小花数 和产量组分等指标， 进行主成分分析 ，同时运用隶属函 6.1 数值对各主成分得分值进行标准化， 获得一个小麦 品种响应倒春寒胁迫综合值 （D），根据D值进行聚类分 析。小麦响应倒春寒胁迫综合值（ D）按照公式（ 1）进行计算：  n i WXU D ii i ，，，，......321n 1   ································ ····· (1)  min max min/ X- X X X XU i i   ································ ······················ (2)  n ii i i P PW 1/ ································ ································ ·· (3) 式中： D——小麦响应倒春寒胁迫综合值； DB34/T 4597 —2023 3 U (Xi)——通过隶属函数方法分析在主成分分析中的标准数据； Xmax——每个主成分中的最大值； Xmin——每个主成分中的最小值； i——样本数量； Wi——每个主成分中的权重系数； Pi——主成分分析中每个主成分的特征值。 基于D综合值和聚类分析图的平均隶属值结果， 冬小麦抗倒春寒性等级按照表 1进行评价。 6.2 表1 冬小麦抗倒春寒性等级 D值 抗倒春寒性等级 D＜0.20 弱 0.20≤D＜0.35 较弱 0.35≤D＜0.50 中等 0.50≤D＜0.65 较强 D≥0.65 强 DB34/T 4597 —2023 4 附录 A （资料性） 可溶性糖含量 将处理组和对照组叶片 在 110℃ 烘箱烘 15 min，然后调至 75℃ 烘干至恒重。干叶片磨粉后称取 50 mg 样品导入 10 mL 刻度离心管，管内加入 4 mL 80% 的乙醇，置于 80℃ 水浴中不断搅拌 40 min， 离心，收集上清液，其残渣加入 2 mL 80% 乙醇重复提 2 次，合并上清液。在上清液中加 10 mg 活性 炭，80℃ 脱色 30 min，80% 乙醇定容至 10 mL，过滤后取滤液 1 mL，加入 5 mL 蒽酮试剂混合，在 沸水中煮沸 10 min，取出后用水冷却至室温，使用紫外可见分光光度计在 625 nm 处比色，计算可溶 性糖含量。 按公式（ A.1）计算可溶性糖含量 ： S=（C×VT）÷（ W×Vt×103）································ ····················· (A.1) 式中： S——可溶性糖含量 （mg/g）； VT——提取液体积 （mL）； Vt——吸取样品液体积 （mL）； W——样品质量（g）。